Местная трансплантация стромальных клеток жировой ткани в сравнительной оценке показателей заживления экспериментальной венозной трофической язвы

Abstract

Цель. Изучить эффективность стромальных клеток жировой ткани в восстановлении эпидермального слоя экспериментальной венозной трофической язвы. Материал и методы. Формирование экспериментальной трофической язвы осуществлено у 14 кроликов-самцов линии Шиншилла. 7 кроликам (основная группа) в комплексном лечении осуществлялась аутотрансплантация мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток (ММСК), выделенных из жировой ткани по методике P. A. Zuk et al. У 7 кроликов (контрольная группа) в местном лечении применялись ежедневные перевязки с обработкой язвы раствором диоксидина и последующим накладыванием мази на гидрофильной основе ("Левомеколь"). В обеих группах на 1, 7, 14, 21-е сутки исследовались морфологические (демаркационный вал, относительный объем лейкоцитарно-некротической зоны и грануляционной ткани) и иммуногистохимические (определение оптической плотности иммунофлюоресценции коллагенов I и II типов, количественный подсчет иммунных клеток, продуцирующих ИЛ-6 и ФНОa) показатели. Результаты. На 7-е сутки в основной группе показатели лейкоцитарно-некротического и лейкоцитарно-демаркационного валов составили 49,21±2,0% и 18,03±1,6% соответственно, в группе сравнения – 51,09±5,8%. Грануляционная ткань составляла в основной группе 32,55±2,4%, в группе сравнения – 29,73±2,9%. Оптическая плотность свечение коллагена III типа превышала показатель для коллагена I типа и составляла 0,069±0,001 ус. ед. св. в основной группе и 0,036±0,001 ус. ед. св. – в контрольной. На 21-е сутки в основной группе отмечалось уменьшение некротического очага, грануляционная ткань содержала большое количество микрососудов, клетки фибропластического ряда, макрофаги, лимфоциты, большое количество гигантских многоядерных клеток. Число клеток, экспрессирующих интерлейкин-6 и фактор некроза опухолей-a, значительно снизилось, отмечалось превалирование молодого интерстициального коллагена III типа. Заключение. Применение клеточной терапии путем аутотрансплантации ММСК, выделенных из жировой ткани, в местном лечении экспериментальной "венозной" трофической язвы, приводит к ускорению репаративных процессов и позволяет достичь ее заживления.

Objective. To study the effectiveness of adipose tissue stromal cells in the restoration of the epidermal layer of an experimental venous trophic ulcer. Methods. The formation of an experimental trophic ulcer was performed in 14 rabbits of the Chinchilla line. 7 rabbits (main group) in complex treatment underwent autotransplantation of multipotent mesenchymal stromal cells (MMSC) isolated from adipose tissue according to the method of Zuk et al.; 7 rabbits (control group) in local treatment used daily dressings with treatment of ulcers with dioxidine solution and subsequent application of hydrophilic ointment ("Levomecol"). In both groups on the 1st, 7th, 14th, and 21st days, morphological (demarcation shaft, relative volume of leukocyte-necrotic zone and granulation tissue) and immunohistochemical (determination of the optical density of immunofluorescence of collagen types I and II, quantitative counting of immune cells producing IL-6 and TNFa) parameters. Results. On the 7th day in the main group, the indicators of leukocyte-necrotic and leukocyte-demarcation shafts were 49.21 ± 2.0% and 18.03 ± 1.6%, respectively, in the comparison group – 51.09 ± 5.8%. Granulation tissue was 32.55 ± 2.4% in the main group, 29.73 ± 2.9% in the comparison group. The optical luminescence density of type III collagen exceeded that of type I collagen and was 0.069 ± 0.001 conventional units of collagen luminescence in the main group and 0.036 ± 0.001 conventional units of collagen luminescence - in the control group. On the 21st day in the main group there was a decrease in necrotic lesions, granulation tissue contained a large number of microvessels, fibroplastic cells, macrophages, lymphocytes, a large number of giant multinucleated cells. The number of cells expressing interleukin-6 and tumor necrosis factor-a decreased significantly, there was a predominance of young interstitial collagen type III. Conclusion. The use of cellular therapy by autotransplantation of MMSCs isolated from adipose tissue in the local treatment of experimental "venous" trophic ulcer, accelerates reparative processes and allows to achieve its healing.